1、首先引物与模板的序列要紧密互补。
2、其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构。
3、再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反应即错配。
4、引物是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与目的基因一端的一条DNA模板链互补，另一个引物与目的基因另一端的另一条DNA模板链互补。
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引物设计原则